堅果是植物的精華部分，營養(yǎng)豐富，果皮堅硬，例如榛子，松子，葵花籽，花生等。堅果中都含有豐富的維生素E。維生素E是一種脂溶性抗氧化劑，能夠阻斷自由基鏈式反應，從而抑制油脂的氧化，被稱為最有效的抗氧化劑。維生素E有8種異構體結構，生理活性也相差甚遠，其中α-維生素E是自然界中分布最廣泛，活性最高的維生素E形式。堅果中α-維生素E是衡量堅果營養(yǎng)水平的重要指標。北京吉天儀器有限公司應用實驗室利用具有完全自主知識產權的快速溶劑萃取聯合液相色譜儀開發(fā)出快速測定堅果中的維生素E含量的新方法，相關結果以《快速溶劑萃取-高效液相色譜法聯用測定堅果中α-維生素E含量》為題發(fā)表在最新一期的《分析儀器》上。

 

圖1.堅果

 

 

實驗儀器

APLE-3500快速溶劑萃取儀，配11 mL萃取池（北京吉天儀器有限公司）；LC-10A高效液相色譜儀（日本島津公司）；分析天平（賽多利斯科學儀器（北京）有限公司，十萬分之一）；TM-2000超級恒溫混勻儀（北京吉天儀器有限公司）。

實驗方案

準確稱取粉碎好的堅果樣品2.00 g，硅藻土和堅果樣品按照1：1混勻倒入預裝纖維素膜的11mL萃取池中，萃取溶劑為正己烷，溫度為110℃，萃取時間為300S，萃取結束后將收集瓶中萃取液全部轉移定容到10mL，渦旋震蕩均勻澄清后，過濾膜，待HPLC分析。

色譜條件

液相色譜采用二元高壓梯度洗脫方式。色譜柱采用Athena C18柱，4.6×250mm，粒徑5μm；流速：0.8mL/min；波長：294nm；進樣量：20μL。梯度洗脫如表1所示

 

線性范圍

在表1的色譜條件下，對配制不同標準系列溶液進行分析，從低濃度到高濃度進樣，在2-100μg/mL的條件下，得出標準曲線方程為Y=11037.30645X+4764.28303，相關系數r =0.9999，標準曲線如圖4所示，α-VE的質量濃度與其峰面積線性關系良好。α-VE標樣（40μg /mL）的高效液相色譜圖見圖3。以3倍信噪比確定最低檢出限，檢出限為0.04μg/mL。

 

 

方法回收率實驗

選取杏仁作為基質樣品，根據樣品制備和萃取條件，并加入一定量的α-VE標準溶液，考察α-維生素E的加標回收情況，回收率見表2。

 

樣品測試

根據上述方法對市購的四種堅果中α-VE的含量進行測定，結果如表3所示。其中葵花籽的含量最高，達到154.65μg/g。

 

結論

本文采用快速溶劑萃取技術萃取堅果（生花生，山核桃，杏仁以及葵花籽）中的α-VE。快速溶劑萃取技術自動化程度高，操作簡單方便，方法與傳統方法比較萃取所需溶劑少，萃取時間短，對α-VE的提取效率高。實驗通過高效液相法對提取的α-VE進行檢測，峰形良好，加標回收率為90.1～97.2%之間。本研究使用的快速溶劑萃取技術快速高效，為提取研究食品中的維生素E提供新的方法。